Nascido na Florença, este discutido navegador veio a estar ao serviço do rei de Espanha e depois do rei de Portugal.
Ao serviço do primeiro, teria participado em duas expedições às Américas Central e do Norte; ao serviço do segundo, acompanhou duas armadas às costas da América do Sul. Na sua carta Mundus Novus, Vespúcio regista que a primeira das viagens feitas com os Portugueses o levou a reconhecer estar em presença de um continente, dada a extensão da costa percorrida. Tal facto levou o cartógrafo Waldseemuller a dar o seu nome, América a esse novo continente num mapa de 1507.